Calcula la concentración proteica en molar y en mg/mL a partir de una lectura A280, del coeficiente de extinción, del paso óptico y del peso molecular.
| Concentración (M) | – |
| Concentración (mg/mL) | – |
Usa esta calculadora para una conversión de Beer–Lambert sobre una proteína purificada, no para un ensayo Bradford, BCA u otro ensayo con colorantes. Necesitas el A280 después del blanco, el coeficiente de extinción molar ε en M⁻¹ cm⁻¹, el paso óptico de la cubeta y el peso molecular si también quieres mg/mL.
La molaridad es A280 ÷ (ε × paso óptico en cm). La concentración másica en mg/mL es esa molaridad por el peso molecular en g/mol, porque mol/L × g/mol = g/L, numéricamente igual a mg/mL.
El paso óptico puede introducirse en centímetros (cm) o pulgadas (in); la calculadora convierte a centímetros antes de aplicar Beer–Lambert. Una cubeta estándar es de 1 cm; un pedestal tipo NanoDrop suele ser de 0,1 cm.
La estimación supone una solución clara y monodispersa y el ε que indiques. La contaminación por ácidos nucleicos, la turbidez y un ε tomado del tampón o de la isoforma incorrectos desplazan el resultado.
A280: La absorbancia a 280 nm informada por el instrumento después del blanco.
ε: Coeficiente de extinción molar a 280 nm, en M⁻¹ cm⁻¹, de ProtParam o de la ficha del producto.
Paso óptico: Camino óptico de la cubeta o del pedestal.
Peso molecular: Peso molecular de la proteína en g/mol (dalton), usado solo para el resultado en mg/mL.
Concentración (M): Concentración molar en mol/L.
Concentración (mg/mL): Concentración másica.
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