Calculez le nombre de nanogrammes d'ADN insert à ajouter à une ligation de clonage pour un rapport molaire choisi.
| Masse d'insert (ng) | – |
Utilisez ce calculateur pour préparer une ligation de clonage à extrémités cohésives ou franches lorsque vous connaissez la longueur et la masse du vecteur, la longueur de l'insert et le nombre de molécules d'insert souhaité par molécule de vecteur (souvent 3:1).
Le calcul est le suivant : masse d'insert (ng) = (pb insert ÷ pb vecteur) × masse de vecteur (ng) × rapport molaire insert:vecteur. Les longueurs sont en paires de bases et les masses en nanogrammes. La formule suppose la même masse moyenne par paire de bases pour le vecteur et l'insert.
Il s'agit d'une préparation au rapport molaire, pas d'une garantie du nombre de colonies. La qualité des enzymes, les extrémités et la pureté de l'ADN restent déterminantes.
Longueur du vecteur (pb) : Longueur du vecteur ou du squelette en paires de bases.
Masse de vecteur (ng) : Quantité d'ADN vecteur que vous mettez dans le tube, en nanogrammes.
Longueur de l'insert (pb) : Longueur de l'insert en paires de bases.
Rapport molaire insert:vecteur : Molécules d'insert par molécule de vecteur. 3 signifie une ligation 3:1.
Masse d'insert (ng) : Nanogrammes d'ADN insert à ajouter à cette quantité de vecteur.
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