Calculez la concentration protéique en molaire et en mg/mL à partir d'une lecture A280, du coefficient d'extinction, du trajet optique et de la masse moléculaire.
| Concentration (M) | – |
| Concentration (mg/mL) | – |
Utilisez ce calculateur pour une conversion de Beer–Lambert sur une protéine purifiée, et non pour un dosage Bradford, BCA ou un autre dosage colorimétrique. Vous avez besoin de l'A280 après le blanc, du coefficient d'extinction molaire ε en M⁻¹ cm⁻¹, du trajet optique de la cuve et de la masse moléculaire si vous voulez aussi les mg/mL.
La molarité est A280 ÷ (ε × trajet optique en cm). La concentration massique en mg/mL est cette molarité multipliée par la masse moléculaire en g/mol, car mol/L × g/mol = g/L, numériquement identique aux mg/mL.
Le trajet optique peut être saisi en centimètres (cm) ou en pouces (in) ; le calculateur convertit en centimètres avant d'appliquer Beer–Lambert. Une cuve standard mesure 1 cm ; un piédestal de type NanoDrop fait souvent 0,1 cm.
Cette estimation suppose une solution limpide et monodisperse et l'ε que vous fournissez. Une contamination par les acides nucléiques, la turbidité et un ε pris dans le mauvais tampon ou la mauvaise isoforme décalent le résultat.
A280 : L'absorbance à 280 nm indiquée par l'instrument après le blanc.
ε : Coefficient d'extinction molaire à 280 nm, en M⁻¹ cm⁻¹, issu de ProtParam ou de la fiche produit.
Trajet optique : Trajet optique de la cuve ou du piédestal.
Masse moléculaire : Masse moléculaire de la protéine en g/mol (daltons), utilisée uniquement pour le résultat en mg/mL.
Concentration (M) : Concentration molaire en mol/L.
Concentration (mg/mL) : Concentration massique.
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