Calcola la concentrazione proteica in molare e in mg/mL da una lettura A280, dal coefficiente di estinzione, dal cammino ottico e dal peso molecolare.
| Concentrazione (M) | – |
| Concentrazione (mg/mL) | – |
Usa questo calcolatore per una conversione Beer–Lambert su una proteina purificata, non per un saggio Bradford, BCA o altri saggi con coloranti. Ti servono l'A280 dopo il bianco, il coefficiente di estinzione molare ε in M⁻¹ cm⁻¹, il cammino ottico della cuvetta e il peso molecolare se vuoi anche i mg/mL.
La molarità è A280 ÷ (ε × cammino ottico in cm). La concentrazione in massa in mg/mL è quella molarità per il peso molecolare in g/mol, perché mol/L × g/mol = g/L, numericamente uguale ai mg/mL.
Il cammino ottico può essere inserito in centimetri (cm) o pollici (in); il calcolatore converte in centimetri prima di applicare Beer–Lambert. Una cuvetta standard è 1 cm; un piedistallo tipo NanoDrop è spesso 0,1 cm.
La stima assume una soluzione limpida e monodispersa e l'ε che fornisci. Contaminazione da acidi nucleici, torbidità e un ε preso dal tampone o dall'isoforma sbagliati spostano il risultato.
A280: L'assorbanza a 280 nm riportata dallo strumento dopo il bianco.
ε: Coefficiente di estinzione molare a 280 nm, in M⁻¹ cm⁻¹, da ProtParam o dalla scheda del prodotto.
Cammino ottico: Cammino ottico della cuvetta o del piedistallo.
Peso molecolare: Peso molecolare della proteina in g/mol (dalton), usato solo per il risultato in mg/mL.
Concentrazione (M): Concentrazione molare in mol/L.
Concentrazione (mg/mL): Concentrazione in massa.
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