Calcule quantos nanogramas de DNA inserto adicionar a uma ligação de clonagem em uma razão molar escolhida.
| Massa do inserto (ng) | – |
Use esta calculadora para montar uma ligação de clonagem de extremidades coesivas ou cegas quando você conhece o comprimento e a massa do vetor, o comprimento do inserto e quantas moléculas de inserto quer por molécula de vetor (muitas vezes 3:1).
O cálculo é: massa de inserto (ng) = (pb inserto ÷ pb vetor) × massa do vetor (ng) × razão molar inserto:vetor. Os comprimentos estão em pares de bases e as massas em nanogramas. A fórmula assume a mesma massa média por par de bases para vetor e inserto.
Esta é uma montagem por razão molar, não uma garantia do número de colônias. Qualidade das enzimas, extremidades e pureza do DNA ainda importam.
Comprimento do vetor (pb): Comprimento do vetor ou do backbone em pares de bases.
Massa do vetor (ng): Quanto DNA vetor você coloca no tubo, em nanogramas.
Comprimento do inserto (pb): Comprimento do inserto em pares de bases.
Razão molar inserto:vetor: Moléculas de inserto por molécula de vetor. 3 significa uma ligação 3:1.
Massa do inserto (ng): Nanogramas de DNA inserto a adicionar àquela quantidade de vetor.
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