Calcule a concentração proteica em molar e em mg/mL a partir de uma leitura A280, do coeficiente de extinção, do caminho ótico e do peso molecular.
| Concentração (M) | – |
| Concentração (mg/mL) | – |
Use esta calculadora para uma conversão de Beer–Lambert numa proteína purificada, não para um ensaio Bradford, BCA ou outro ensaio com corantes. Precisa do A280 após o branco, do coeficiente de extinção molar ε em M⁻¹ cm⁻¹, do caminho ótico da cuvete e do peso molecular se também quiser mg/mL.
A molaridade é A280 ÷ (ε × caminho ótico em cm). A concentração mássica em mg/mL é essa molaridade vezes o peso molecular em g/mol, porque mol/L × g/mol = g/L, numericamente igual a mg/mL.
O caminho ótico pode ser introduzido em centímetros (cm) ou polegadas (in); a calculadora converte para centímetros antes de aplicar Beer–Lambert. Uma cuvete padrão é de 1 cm; um pedestal tipo NanoDrop é muitas vezes de 0,1 cm.
A estimativa assume uma solução límpida e monodispersa e o ε que indicar. Contaminação por ácidos nucleicos, turvação e um ε retirado do tampão ou da isoforma errados deslocam o resultado.
A280: A absorbância a 280 nm reportada pelo instrumento após o branco.
ε: Coeficiente de extinção molar a 280 nm, em M⁻¹ cm⁻¹, do ProtParam ou da ficha do produto.
Caminho ótico: Caminho ótico da cuvete ou do pedestal.
Peso molecular: Peso molecular da proteína em g/mol (dalton), usado apenas para o resultado em mg/mL.
Concentração (M): Concentração molar em mol/L.
Concentração (mg/mL): Concentração mássica.
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