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Calculadora de eficiência qPCR

Calcule a eficiência de amplificação a partir do declive de uma curva padrão de qPCR.

 

Eficiência E
Eficiência (%)
Amplificação (1+E)

Sobre esta calculadora

Use esta calculadora como verificação de qualidade da corrida. Cem por cento significa que o produto duplica a cada ciclo. Obtenha o declive de um gráfico do limiar de ciclo (Ct) versus log₁₀ da diluição, do número de cópias ou de outra quantidade conhecida.

A eficiência E é 10^(−1/declive) − 1. A percentagem é E × 100. A amplificação é 1 + E (2,0 a 100%). Uma série de diluições 1:10 com duplicação ideal tem um declive de cerca de −3,32. O declive deve ser negativo; um declive positivo ou nulo não é uma curva padrão válida.

Uma eficiência aceitável é muitas vezes referida perto de 90–110%, mas a janela depende do ensaio, da química e do SOP do laboratório. Esta calculadora não julga aprovação ou reprovação; apenas converte o declive.

Declive da curva padrão: O declive de Ct versus log₁₀(quantidade). Uma série de diluições 1:10 dá muitas vezes cerca de −3,3 quando a eficiência está perto de 100%.

Eficiência E: Eficiência fracionária (1,0 = 100%, 0,9 = 90%).

Eficiência (%): O mesmo valor em percentagem.

Amplificação (1+E): Aumento por ciclo.